刘女士最初来到英医院的时候，没想到自己的AMH只有0.5。失望之下只能选择微刺激方案。结果不出所料，取卵2颗，数量很少。于是，刘女士对那个周期没抱什么希望养囊三天看卵子五天看精子，准备再次进周。谁知后续的发展远远超出了她的想象……
这两颗珍贵的卵子都成功受精，又都发育成初期胚。5天后一颗胚胎长成囊胚，又过了一天，另一颗胚胎也长成了囊胚！两颗卵=两个囊胚！对刘女士来说这简直就是一个奇迹。
不过类似的案例在英医院并不算稀奇。养囊技术可是英医院的立身之本。今天，我们就聊聊胚胎培养背后的那些“幕后英雄”。正是有了他们的努力，卵少的姑娘们才能在最短的时间内顺利毕业。
在之前的文章中我们讲到过胚胎实验室的硬件条件，也就是卵子和精子取出之后在实验室生存必备的条件。在这个基础上，胚胎培养师们采用人工授精（AI）和体外受精-胚胎移植（IVF-ET）及其衍生技术，例如卵母细胞单精子显微注射（ICSI）、激光辅助孵化、玻璃化冷冻、胚胎活检和种植前遗传学诊断等，对人类的精子卵子、及形成的胚胎进行体外操作，最终将胚胎移回子宫发育成胎儿。
了解胚胎实验室的详情，请戳这里——
那么，胚胎是怎么一步一步形成的，我们的幕后英雄们——培养师都做了哪些？今天就为大家介绍一下胚胎培养师和他们的工作。
培养师的专业技术水平将直接影响受精卵的生死存亡，也影响着准父母的每一次尝试妊娠的结局。一般的内科外科医学，患者们最看重的是医生；但是对辅助生殖而言，这些胚胎培养师才是真正的幕后英雄。
说明：本文中的培养技术介绍仅作为科普目的，实际使用的场景和操作细节将由医院和培养师决定。由于可能涉及技术保护等问题，不提供技术细节的进一步解释，也不能提供对每一位具体患者培养情况的详细说明。
50+培养师团队
一个合格的专业胚胎师，不仅有学历上的要求，还必须通过非常严格、系统的培训和考核才能上岗。而完全掌握这些技术、胜任临床胚胎实验室的工作，往往需要数年的持续培训与实践操作。
目前日本英医院有50多名胚胎学培养师。大多是细胞生物学专业的他们，需要经过至少4年练习才能临床操作。所有培养步骤均有精细化的规程指导，将日本的匠人精神发挥到极致。
相比之下，国内生殖中心正处于大力发展的阶段，临床胚胎学高技术人才比较妇产科医生更为缺乏！未来还将迫切需要大量的受过系统、良好培训的胚胎学家和高级胚胎技师。
卵子前培养
试管过程中用药物促排卵，常常导致卵子生长不均匀。卵子取出后，成熟的MII级卵会直接做受精培养；不成熟的MI卵，会根据情况等待卵子成熟再做受精。虽然体外培养成熟的卵子，在受精率上会低于体内成熟的卵子，但是卵子前培养技术在某些情况下仍然会作为一项补充方案。在日本英医院则会由培养师决定是否需要使用前培养技术。
显微受精ICSI
根据精子情况不同，我们采用体外受精（自然受精）、显微受精（ICSI）或二者结合的方式。
在冻精或者鲜精精子状况不好、曾经有过受精障碍、或者精液的观察结果不理想的情况下，培养师会使用显微受精。显微受精或称注射受精（ICSI, Intra- Sperm ），俗称二代试管婴儿技术，是在显微镜下观察精子的活动情况，选择最强壮健康的精子直接注射到卵子中，进行受精和孵化。
1000倍以上显微镜IMSI
ICSI受精失败的一个原因可能是源于选择的精子有问题。培养师是在显微镜下观察精子的形态和活动，从而挑选精子的。一般显微受精的显微镜设备在400倍左右，英医院发现如果使用1000倍以上的显微镜来观察，就能够更准确地甄别精子的头部是否有空泡。所以在一些反复受精失败的情况下，采用IMSI高精度显微受精技术也是一个补充方案。
Piezo-ICSI超音振动显微受精
女性随着年龄的增长，卵子质量下降。普通的显微受精过程，对于脆弱的卵子可能会有一定的损伤风险。
Piezo－ICSI（超音振动显微授精）方法，与一般显微受精方式不同，采用平口而不是尖口的注射针，使用超音振动技术打开卵子透明带，从而减少精子注射过程中对卵子产生的损害，可以使高龄女性胚胎养囊率有所提升。
根据相关报道，Piezo-ICSI还可以提高卵子的受精率。比较传统的显微受精方式而言，受精率从66.4%提高到79.4%，受精以后的退化率（即停止分裂）从18.6%降低到11.9%。而妊娠率从14.9%提高到23.1%。因此，针对一些大龄及反复受精失败的情况，培养师可能会尝试采用Piezo方法来提高受精率。
摇动培养法TECS
自然受孕的情况下，受精卵前5天是在母亲的输卵管内游走，承受了一定由输卵管内绒毛抖动带来的机械压力。这种压力能增强受精卵的成长力，使其变得强壮。
为了达到这种接近母体的自然状态，英医院采用了特殊装置使受精卵始终处在摇动状态下而进行培养。对平均年龄为37.1岁女性患者，平均采卵次数4.7次，且不孕史平均长达5年半的患者进行了这种摇动下的培养，英医院发现培养出的囊胚的生命力明显高于一般平均水平。
胚胎玻璃化冷冻
胚胎的冷冻和复苏，是衡量生殖实验室作业水平的标准之一。英医院采用其特有的玻璃化速冻和解冻技术，胚胎解冻复苏率可达99.99%。
不同于被广泛使用的由试剂公司提供的标准冷冻溶解试剂及4步溶解法，英医院自主研发的特制培养液及独有的6步溶解法，使胚胎溶解复活的生存率可以达到99.99%！
顺便给大家科普一下，胚胎的冷冻解冻复苏率要比卵子高很多，所以有伴侣的情况下应该冷冻胚胎（受精卵）而不是卵子。
两位培养师正在将胚胎放入零下196度液氮罐中
胚胎辅助孵化AHA
受精卵的外围被一层蛋白质外壳所包裹，这个外壳叫透明带。在胚胎的冷冻解冻过程中，透明带可能会增厚变得僵硬。解冻后胚胎可能会由于透明带变硬而无法孵化而出。激光辅助孵化AHA 就是用激光使局部透明带溶解变薄，促进孵化。
胚胎PGT采样技术
随着基因检测技术的不断升级，越来越多的患者选择在移植前对胚胎进行染色体采样和检测，从而提高移植成功率养囊三天看卵子五天看精子，降低流产率和胎儿的健康风险。
PGT采样一般是从囊胚数百个细胞中抽取2-5个细胞进行染色体采样。传统采用的采样方式，是用吸管直接深入囊胚中采集，有一定损伤核心细胞团的风险。目前英医院采用的样本提取方法是初期胚打孔＋囊胚采样方式，不深入细胞内取样，最大程度降低胚胎细胞损伤的风险。
胚胎采样操作方法
在第三天初期胚上打孔：从培养箱中取出胚胎，在专用显微操作台上用特定装置将胚胎固定 ，然后用激光切除法在胚胎透明带的合适位置上开一小孔。
胚胎继续培养到第五天，形成囊胚细胞溢出：胚胎不断分裂成长时，有部分细胞从开的小孔中溢出，从溢出细胞中吸取几个细胞进入微细导管中。
将取出的细胞送检：通过染色体提取和分析，判断该胚胎有无遗传疾病同时鉴定胚胎性别。通常检测时间需要2-4周。
将囊胚冷冻存储：所有囊胚都将被冷冻存储，等到染色体结果出来后，患者可以选择胚胎进行移植。
如果要用几句话把英医院的技术特点讲清楚，还真不是一件容易的事。所谓匠人精神有时候需要细细品味，毕竟天使在想象中，魔鬼在细节里......
作为以胚胎培养科技和日式个体化医疗服务理念见长的英医院，对于平均年龄39岁的患者，囊胚培养成功率依然可以达到1/3。